在小鼠中AAV介导的皮质脊髓轨道追踪中优化立体有毒注射策略
Wei Wang1, Tehan Zhang2, Shaolong Li1
1Department of Orthopaedics, Qilu Hospital, Cheeloo College of Medicine, Shandong University, Jinan, Shandong, 250012, PR China; Shandong University Centre for Orthopaedics, Advanced Medical Research Institute, Cheeloo College of Medicine, Shandong University, Jinan, Shandong, 250012, PR China.
Journal of neuroscience methods
|January 9, 2026
概括
在小鼠的皮质脊柱管 (CST) 中,通过一次注射和两周间隔,可以优化腺相关病毒的追踪. 这种简化的协议实现了高效的CST标签,减少了程序复杂性,提高了运动控制研究的可重复性.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 分子生物学分子生物学
- 人体解剖学 解剖学 解剖学
背景情况:
- 皮质脊髓管 (CST) 对于自愿运动控制至关重要.
- 腺关联病毒 (AAV) 介导的原级追踪是标记小鼠中CST预测的标准.
- 对于CST追踪,最佳的立体毒注射坐标和注射后的间隔还没有很好地定义.
研究的目的:
- 系统地评估和优化AAV介导的CST在小鼠中的前级追踪策略.
- 确定最佳的立体毒性注射坐标和注射后间隔,以实现高效的CST标签.
- 开发一个简化和可重复的CST追踪协议.
主要方法:
- 评估了八种皮质注射策略,其前后 (AP) 和中侧 (ML) 坐标,注射点数和注射后间隔各不相同.
- 在多个脊柱水平 (C2,C5,T2,T6,L2) 量化评估CST标记,使用转的轴突数 (TAC),平均光强度 (MFI) 和转面积.
- 将标签效率规范化到C2部分进行标准化比较.
主要成果:
- CST标签 (TAC和MFI) 在宫和胸部水平上通常是可比的,无论是AP/ML坐标还是单点/多点注射.
- 标签效率降低仅在L2脊柱水平观察到,具体的AP坐标 (+0.70mm).
- 将注射后的时间间隔从四周缩短到两周并没有影响标签的效率.
结论:
- 通过单点注射,可以从L2和面部段获得有效的CST标签.
- 最佳注射坐标包括AP范围为0.0到+0.7mm (ML固定在1.2mm) 或ML范围为+0.7到+1.5mm (AP固定在0.0mm).
- 一个简化的,单次注射的,为期2周的协议提供了与传统方法相比的标签保真度,同时减少了程序负担并提高了可重复性.
