在动物质瘤细胞培养和脑切片中测量神经因子X通路活动

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 生物化学 生物化学
• 药理学 药理学 是一个学科.

背景情况:

• 凝血因子X (FX) 和其活性形式 (FXa) 涉及神经炎症.
• 在神经组织中检测FXa是具有挑战性的,因为与血相比,其水平较低.
• 需要一种敏感和特定的方法来量化神经样本中的FXa活性.

研究的目的:

• 开发和验证一种用于测量神经组织中FXa活性的敏感方法.
• 研究大脑切片和质瘤细胞系中FXa活动的调节.
• 要区分基底,激活和分泌的FXa活动.

主要方法:

• 使用原基质测定与特定抑制剂用于FXa量化.
• 在人体血中验证了测定,随后将其应用于小鼠大脑切片和人类,老鼠和小鼠质瘤细胞系.
• 与FX和FXa一起使用FXa抑制剂 (apixaban) 和激活剂 (拉塞尔蛇毒X - RVVX),以探测FXa活性.

主要成果:

• 开发的测定成功测量了血和神经样本中的FXa活性.
• 在人血和小鼠大脑切片中,RVVX显著增加了FXa活性.
• 阿皮克萨班在小鼠大脑切片 (分泌与切片相关) 和质瘤细胞 (分泌) 中差异抑制了FXa活性.
• 多糖调节RVVX诱导的FXa活性和质瘤细胞中的血栓激素活性.
• 神经组织中的FXa活性需要特定的激活器来检测.

结论:

• 建立了一种基于光的敏感方法,用于检测神经组织内FXa活动的微妙变化.
• 与分泌的FXa活动相比,与脑切片相关的FXa活动对激活剂和抑制剂表现出不同的反应,突出显示了复杂的调节.
• 特定的实验条件,包括使用激活器,对于检测神经环境中的FXa活性至关重要.