复杂样本矩阵中的抗体 - 药物合物的快速和选择性表征,采用本源亲和液体染色学 - 质谱学
Dan Bach Kristensen1, Nanna Sofie Eskesen1, Clara Coll-Satue1
1Department of Analytics and Formulation, Symphogen Servier, Ballerup, Denmark.
一种新的直接亲和液态染色体质谱法方法分析血清中的抗体-药物联合体 (ADC). 这种快速技术准确地测量药物抗体比率和生物转化,无需复杂的样本准备,改善生物制药开发.
科学领域:
- 生物制药学分析
- 分析化学 分析化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 强大的分析方法对于评估生物药物生物转化在生物基质中至关重要.
- 目前的抗体药物联合体 (ADC) 方法通常涉及耗时的离线丰富和广泛的染色学,限制了吞吐量.
- 需要直接分析方法来简化ADC和相关生物制药的评估.
研究的目的:
- 开发一种快速,直接的分析方法,用于评估复杂生物矩阵中的抗体-药物合物 (ADC) 和其他抗体衍生形式.
- 为了实现ADC质量属性的高通量监测,包括药物抗体比率 (DAR) 和药物负载分布 (DLD).
- 用开发的方法研究血清中的ADC生物转化概况.
主要方法:
- 开发一种使用POROS CaptureSelect FcXL列的原生亲和液态染色体质谱法 (aLC-MS) 方法.
- 优化溶剂和MS参数,用于直接1D aLC-MS分析血清中的ADC.
- 使用ADC稳定性研究和小鼠血清度系列的方法评估.
主要成果:
- 通过aLC-MS方法,可以直接和准确地确定DAR,DLD和相对药物丰度,而无需染色学峰值集成.
- 稳定性研究揭示了在血清中不同的ADC生物转化途径,包括maleimide水解和二硫化物交换.
- 该方法表现出极好的线性 (R2 = 0.99),从血清中125-2000μg/mL,敏感度降至31.25μg/mL.
结论:
- 开发的快速和选择性的aLC-MS方法可在复杂的矩阵中高通量监测ADC质量属性,且样本准备最小.
- 这种方法通过简化数据处理和实现自动报告来支持生物制药产品开发和生物分析.
- 该方法为了解ADC生物转化和确保产品质量提供了一个强大的平台.
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