在mRNA-脂质纳米颗粒的制备过程中,缓冲区交换引起的形态变化逐步发生,因为pH值升高
Yujia He1, Emily H Pilkington1, Hee Jung Kang1
1Monash Institute of Pharmaceutical Sciences, Monash University, Parkville, VIC 3052, Australia.
电离性脂质纳米粒子 (LNPs) 在制造缓冲区交换过程中经历结构变化. 在中间pH下发生粒子融合和斑点形成,而pH7.4时脂质类型会影响最终结构.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 材料科学 材料科学 材料科学
- 生物物理学的生物物理.
背景情况:
- 脂质纳米粒子 (LNP) 对于核酸输送至关重要.
- 可电离的阴离子脂质对于低pH下LNP形成至关重要.
- 制造涉及缓冲器交换和乙醇去除,以完成LNP.
研究的目的:
- 在缓冲区交换期间调查LNP形态.
- 了解粒子相互作用和在中间pH的结构变化.
- 为了比较与不同电离性脂质 (MC3,ALC-0315,SM-102) 形成的LNP.
主要方法:
- 光共振能量转移 (FRET) 试验用于粒子相互作用.
- 粒子大小测量和冷电子显微镜 (cryo-EM) 用于形态学.
- 用于结构分析的小角度X射线散射 (SAXS).
主要成果:
- 在缓冲区交换过程中观察到的粒子相互作用和聚变.
- 在pH值为5.5.5时形成的具有斑状突起的稳定颗粒.
- 由于pKa较高,SM-102 LNP在更高的pH值下显示了融合和生长.
- 在pH7.4时,MC3和ALC-0315LNPs失去了双层结构,与DODMA和SM-102LNPs不同.
结论:
- 在缓冲区交换期间的LNP结构转换是pH-依赖的.
- 电离性脂质特性,如pKa,影响LNP的稳定性和形态.
- 了解这些转变是优化LNP制造和功能的关键.
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