从潜水到空气-液体接口的Calu-3细胞的分子表征,以模拟肺部感染
Deivid Martins Santos1, Edmarcia Elisa de Souza2, Janaina Macedo-da-Silva1
1GlycoProteomics Laboratory, Department of Parasitology, Institute of Biomedical Sciences, University of São Paulo, São Paulo 05508-000, Brazil.
使用Calu-3细胞的空气液体接口 (ALI) 模型模仿了人类支气管上皮质. 极化细胞显示出增强的能量生产,免疫分子表达和蛋白质处理,有助于肺部疾病研究.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 呼吸系统药物 呼吸系统药物
- 蛋白质组学和转录组学.
背景情况:
- 使用Calu-3细胞的空气液体接口 (ALI) 模型用于肺部疾病建模.
- 卡卢-3细胞在ALI中极化,成为产生粘液的细胞,并与原始细胞相似.
- 在ALI模型中对差异表达路径的研究有限.
研究的目的:
- 在潜水 (非极化) 和ALI (极化) 条件下,分析Calu-3细胞的蛋白质组和转录组.
- 在偏振与非偏振的Calu-3细胞中识别差异表达的途径和生物过程.
- 将ALI培养的Calu-3细胞与正常的肺上皮进行比较,并评估它们对SARS-CoV-2感染的反应.
主要方法:
- 在潜水和ALI培养物中的Calu-3细胞的蛋白质组和转录组分析.
- 免疫涂抹和光显微镜以确认蛋白质表达和细胞组织.
- 极化Calu-3细胞的SARS-CoV-2感染.
主要成果:
- 非极化细胞显示细胞复制增加;极化细胞表现出增强的能量生产,蛋白质成熟/循环和免疫分子表达.
- 在极化细胞中观察到的蛋白质质量控制和抗原处理/呈现途径的升级.
- 极化细胞表现出增加的粘液和紧结的表达,模仿正常的支气管上皮;SARS-CoV-2感染导致由于增加的ACE2导致更高的细胞死亡.
结论:
- ALI模型有效地复制了人类支气管上皮的关键特征.
- 差异性奥米克分析揭示了非极化和极化Calu-3细胞之间不同的细胞功能.
- 这项研究增强了对ALI模型在肺病研究和SARS-CoV-2感染中的应用的理解.
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