通过指导设计空间建模克服LC分离氧醇的挑战:比较三个静止阶段
Andrea Castellaneta1, Ilario Losito2, Claudio Crisau1
1Dipartimento di Chimica, Università degli Studi di Bari Aldo Moro, Via Orabona 4, 70126 Bari, Italy.
优化液体染色学-质谱学 (LC-MS) 用于氧 (OS) 分析,这项研究使用设计空间建模来改善异构体的分离. 使用烯 (ES-CN) 和五烯 (F5) 静止相实现了更快的方法.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
- 染色体学 染色体学 是一种染色学.
背景情况:
- 液体染色体质谱法 (LC-MS) 是首选用于氧化醇 (OS) 分析,而不是GC-MS,因为它消除了化学衍生物.
- 在电喷电离 (ESI) 或大气压化学电离 (APCI) 中的源内碎片化可以产生异构离子,这阻碍了仅通过质谱学的明确识别.
- 因此,染色学分离对于准确的氧醇分析至关重要,特别是用于区分异构体.
研究的目的:
- 优化逆相液态染色学 (LC) 对于十种临床相关的氧醇 (OS) 的分离.
- 评估不同静止相 (C18,ES-CN,F5) 对于溶解异构氧醇的有效性.
- 采用分析设计空间建模,以在氧醇分析中开发高效方法.
主要方法:
- 使用DryLab®软件利用设计空间建模来优化LC分离.
- 在核心外HPLC柱 (150 × 2.1mm, 2.7μm) 上研究了三种静止相:八甲基 (C18),烯基 (ES-CN) 和五烯基 (F5).
- 优化了关键方法参数,包括梯度度,柱体温度和有机修饰剂成分 (甲醇/乙二混合物).
主要成果:
- 优化的方法成功地解决了大多数氧化的位置异构体和异构体.
- C18阶段提供了高的选择性,但导致更长的运行时间 (约. 80分钟) 的时间.
- ES-CN和F5阶段实现了更快的有效运行 (<45分钟);ES-CN还将可能由π-π相互作用引起的保留/化学工件降到最低.
结论:
- 分析设计空间建模对于优化复杂的氧化醇混合物的LC分离是有效的.
- 与C18.18相比,ES-CN和F5静止阶段在氧化醇分析中提供了速度和工件减少的优势.
- 虽然大多数异构体得到了分离,但25-R/S-26-氧胆固醇表基体的分离仍然具有挑战性.
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