建立和应用一种新型蛋白质微阵列,用于血清检测和分化塞内卡病毒A
Dexin Li1, Junhua Deng2, Zenglin Wang1
1Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, 225009, China, yzu.edu.cn.
一种新的蛋白质微阵列可以区分塞内卡病毒A (SVA) 感染的猪和接种疫苗的猪. 这种诊断工具可以检测SVA结构性和非结构性蛋白质的抗体,有助于疾病控制.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 免疫诊断 免疫诊断 免疫诊断 免疫诊断
- 猪病研究研究 猪病研究
背景情况:
- 塞内卡病毒A (SVA) 导致猪囊泡性疾病,其症状模仿其他严重疾病.
- 精确区分感染和接种疫苗的动物 (DIVA) 对于SVA控制和监测至关重要.
- 现有的诊断方法可能缺乏有效的DIVA策略所需的特异性或吞吐量.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的蛋白质微阵列,用于对SVA抗体的双重血清检测.
- 为了使SVA感染的动物与用无活化SVA疫苗接种疫苗的动物有区别.
- 为了识别SVA感染的早期血清学标志物.
主要方法:
- 使用His标记的协奏抗原 (VP2-VP3-VP1和3AB-3C) 在大肠杆菌中表达的蛋白质微阵列的开发.
- 净化和检测抗原在聚二甲基素 (PDMS) 基板上的抗原,以检测抗体.
- 使用点灰度值和样本与正值 (S/P) 比率与已确定的切线值来量化结果.
主要成果:
- 这种微阵列成功地将被禁用疫苗免疫的猪 (仅对VP2-VP3-VP1阳性) 与被SVA挑战的猪 (对两种抗原都阳性) 区分开来.
- 在受挑战的猪中,对结构性蛋白质抗原 (VP2-VP3-VP1) 的血清转化比对非结构性抗原 (3AB-3C) 的血清转化早4天.
- 该试验与病毒中和试验 (VNT) 达到了97.5%的一致性,表明其可靠性很高.
结论:
- 开发的蛋白质微阵列是DIVA对塞内卡病毒A的血清检测的可靠和高通量工具.
- 对结构性和非结构性蛋白质的抗体检测允许有效区分受感染的动物和接种疫苗的动物.
- 对VP2-VP3-VP1抗体的早期检测突出了其作为早期SVA诊断的敏感标记物的潜力.
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