快速检测叶线虫,Litylenchus crenatae使用复合酶聚合酶放大试验与侧向流量测量棒
Mihail Kantor1, Sergei A Subbotin2
1Plant Pathology & Environmental Microbiology Department, The Pennsylvania State University, University Park, Pennsylvania, United States of America.
一种新的快速检测方法用于叶线虫 (Litylenchus crenatae) 使用复合酶聚合酶放大 (RPA) 和侧流 (LF) 测量棒. 这种可在现场部署的测定方法可以在受感染的树木中快速识别叶病 (BLD).
科学领域:
- 植物病理学 植物病理学
- 遗体学 遗体学 是一个学科.
- 分子诊断学 分子诊断学
背景情况:
- 叶病 (BLD) 是对树的严重威胁,由叶线虫 (Litylenchus crenatae) 引起.
- 目前的诊断方法,包括形态测量和PCR,耗时且无法在现场部署.
- 快速和准确的检测对于及时管理BLD至关重要.
研究的目的:
- 开发一种快速,灵敏,可在现场部署的Litylenchus crenatae的诊断试验.
- 为了利用复合酶聚合酶放大 (RPA) 与侧流 (LF) 测量棒相结合,用于线虫检测.
- 为了能够及早识别叶病,制定有效的管理策略.
主要方法:
- 开发一种重组酶聚合酶放大 (RPA) 试验,针对Litylenchus crenatae的ITS rRNA基因.
- 整合RPA测定与侧流 (LF) 测量棒进行视觉检测.
- 对非目标线虫物种的测定特异性的验证,以及从原始线虫和植物叶子DNA提取物中直接检测.
主要成果:
- 开发的LF-RPA测定证明了对Litylenchus crenatae检测的高特异性和灵敏性.
- 该试验在28-30分钟内提供了可靠的结果.
- 对于原始提取物,灵敏度达到每反应管0.002个线虫,对于叶子DNA提取物,每反应管0.03个线虫.
结论:
- LF-RPA测定是一种实用和有效的工具,用于快速地在现场检测Litylenchus crenatae.
- 这种诊断方法支持林业和植物诊所对叶病的及时管理决策.
- 该试验促进了早期干预,有可能减轻BLD对树种群的影响.
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