一种简单而高度敏感的LC-MS/MS生物分析方法,用于二胺酸和二胺酸在血中的寡核酸

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 生物化学 生物化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 使用LC-MS/MS对二胺酸形类寡合物的量化面临挑战,因为灵敏度低.
• 传统的固体相提取方法对这些特定的寡合体的回收率很低.
• 需要一种更敏感的生物分析方法,并优化预处理以准确确定寡合体.

研究的目的:

• 开发和验证一种高度敏感的生物分析方法,用于量化二胺酸在血中的二胺酸寡合物.
• 改进现有的预处理技术,以提高恢复和灵敏度.
• 建立适用于各种二胺酸形态类寡合物的可靠方法.

主要方法:

• 采用蛋白沉 (PPT) 与甲醇进行样本预处理,实现高回收率 (>90%) 的viltolarsen.
• 采用逆相液态色谱 (RPLC) 与梯度化以最大限度地减少离子抑制.
• 结合PPT和RPLC用于优化LC-MS/MS分析.

主要成果:

• 维尔托拉森的下限量化值为1ng/mL,比已批准的寡合物 (10-20 ng/mL) 显著更高的灵敏度.
• 显示出优异的间距准确性 (97.1%109%) 和精度 (2.56%10.5%).
• 成功地将该方法应用于另一种二胺酸形态烯酸寡合物, ψM23D (+07-18).

结论:

• 通过优化RPLC和PPT,建立了一种简单,高度敏感的生物分析方法来确定viltolarsen.
• 验证了该方法对具有不同序列的二胺酸形态类寡合物的适用性.
• 开发的方法为寡合体量化提供了更好的灵敏度和恢复.