基于ATP水解和CRISPR/Cas12a的性酸酶活性检测

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 食品科学 食品科学 食品科学

背景情况:

• 酸酶 (ALP) 是牲畜健康,营养和牛奶安全的关键生物标志物.
• 准确和快速检测ALP对于食品安全和食品科学应用至关重要.

研究的目的:

• 开发一种新,灵敏和快速的方法来检测食品样本中的性酸酶 (ALP) 活性.
• 使用ATP水解与CRISPR/Cas12a系统相结合用于ALP检测.

主要方法:

• 设计了一种DNA分子识别锁探头系统,涉及一种ATP特异性胺和一个激活器链.
• 该试验利用了由ATP水解触发的或由ALP介导脱化抑制的CRISPR/Cas12a跨裂变活性.
• 光信号生成取决于Cas12a蛋白的激活.

主要成果:

• 该试验实现了ALP活性2.52mU/mL的检测极限,线性范围为0-18.75mU/mL.
• 总检测时间优化为70分钟.
• 在各种牲畜样本和牛奶中成功应用,回收率为92-99%.

结论:

• 在食品样本中成功开发了一种灵敏,具有成本效益和快速的ALP检测方法.
• 这种新的测定方法对食品安全监测点检测 (POCT) 设备的开发具有前景.