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Updated: May 6, 2026
11:10
Expression, Purification, and Antimicrobial Activity of S100A12
Published on: May 13, 2017
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来自Serratia marcescens AD-W2的重组酸酶的异构表达,净化和功能特征
Devtulya Chander1, Diksha Koul1, Shubham Singh2,3
1Fermentation and Microbial Biotechnology Division, CSIR-Indian Institute of Integrative Medicine, Canal Road, Jammu, 180001, India.
World journal of microbiology & biotechnology
|February 23, 2026
概括
在大肠杆菌中产生的重组酸酶提供了一种安全有效的抗炎药物. 这项研究优化了其生产和净化,证明了与商业形式相比的活性.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 酶工程是什么? 酶工程是什么?
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
背景情况:
- 治疗性酶酸酶 (Serratiopeptidase) 传统上是从酸 (Serratia marcescens) 中获得的.
- 由于对原始细菌的生物安全问题,在大肠杆菌 (E. coli) 中进行重组生产提供了更安全的替代方案.
研究的目的:
- 在大肠杆菌K12中克隆和异质地表达来自S. marcescensAD-W2的热活性酸酶基因.
- 为了优化表达条件,以产生高产量的重组酸酶.
- 描述纯化的重组酶,并评估其抗炎作用的潜力.
主要方法:
- 在E. coli K12中使用pET28a等离子体进行基因克隆和异质表达.
- 优化表达参数,包括温度,光密度,诱导度 (L-rhamnose,IPTG) 和溶解氧.
- 使用触角流过 (TFF) 和透过的单步净化和重新折叠.
- 在LPS刺激的RAW 264.7细胞上进行酶活性测定,动力分析 (Km) 和体外抗炎测试.
主要成果:
- 在优化条件下,在9小时内产生了190 mg/g (4747 mg/L) 的酸酶.
- 净化复合酸酶显示出高特异活性 (1800U/mg),在pH9.0和50°C时具有最佳活性.
- 动力学分析显示,素的Km为1.38 mg/mL.
- 再组合酶通过抑制氧化和促炎细胞因子释放,表现出与商业酸盐酶相似的抗炎作用.
结论:
- 再组合酸酶可以在大肠杆菌K12中有效地产生.
- 纯化的酶具有显著的蛋白质分解和抗炎活性.
- 这种重组酶代表了治疗应用的安全,有效和有前途的替代方案.
