在慢性乙型肝炎患者中检测和表征乙型肝炎病毒双链线性DNA衍生的共闭环形DNA

科学领域:

• 肝病学 肝病学是一种肝病学.
• 病毒学 病毒学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 乙型肝炎病毒 (HBV) 复制产生双链线性DNA (dslDNA).
• 这种dslDNA可以重组成病毒集成或dslDNA衍生的共闭圆形DNA (dsl-cccDNA).
• 插入和删除 (INDEL) 将dsl-cccDNA与真实cccDNA区分开来,但其在慢性乙型肝炎 (CHB) 中的流行程度尚不清楚.

研究的目的:

• 研究dsl-cccDNA在CHB患者中的流行率和特征.
• 使用INDEL分析将dsl-cccDNA与真实的cccDNA区分开来.
• 探索dsl-cccDNA与HBeAg状态和病毒载量的关联.

主要方法:

• 针对HBV的下一代测序 (NGS) 用于56例从未接受抗病毒治疗的CHB患者的肝脏活检.
• 使用PSAD-cccDNA PCR NGS证实并表征了dsl-cccDNA候选物.
• 在特定的ccccDNA区域 (DR2-1,DR1) 内的INDEL分析确定了dsl-cccDNA物种.

主要成果:

• 确定了32个dsl-cccDNA阳性候选者,其中22个来自HBeAg(+) 和10个来自HBeAg(-) 患者.
• 在所有已识别的dsl-cccDNA样本中观察到X基因区域的异质~22-nt删除.
• 在HBeAg(+) 患者中,dsl-cccDNA的发病率和多样性更高,与ccccDNA水平和血清病毒载荷正相关.

结论:

• 在HBeAg(+) CHB受试者中,dsl-cccDNA更丰富和多样化.
• 复制缺陷的dsl-cccDNA的存在可能会导致免疫逃避和HBV整合.
• dsl-cccDNA可能会使慢性乙型肝炎的发病过程复杂化.