在体外和血液中检测不稳定的NO-ferroheme复合物的敏感和特定的方法

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 生理学 生理学 生理学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 氧化 (NO) 通过NO合成酶或化物还原合成.
• NO可以形成一个稳定的NO-ferroheme复合体,具有血管扩张和信号特性.
• 准确的检测方法在生物系统中NO-ferroheme对于进一步的研究至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证用于NO-ferroheme检测的敏感和特定测定.
• 为了使NO-ferroheme的形成,运输和信号的体内和体外研究.
• 在体内研究NO-ferroheme在败血症模型中的形成.

主要方法:

• 经典测定 (酸性三化物) 的调整,对NO-铁血,S-基醇和酸盐进行特定的预处理 (AS,HgCl2).
• 开发一种基于铁化物/化物的新测定方法,用于NO-ferroheme.
• 在各种生物矩阵 (缓冲器,血,全血) 和体内小鼠模型中验证分析.

主要成果:

• 开发并验证了高灵敏度 (低至5nM) 和NO-ferroheme的特定测定.
• 在缓冲体,血,全血和体内成功检测和定量NO-铁血.
• 在用LPS治疗的小鼠体内检测和量化了NO-铁血的形成,模拟了败血症.

结论:

• 现在可用于NO-ferroheme量化验证的敏感和特定测定.
• 这些测定有助于在体内和体外对NO-铁血素的研究.
• 在小鼠败血症模型中第一个体内血NO-ferroheme形成的演示.