优化基于U937细胞的记者系统,以评估ustekinumab与trastuzumab的ADCC活性

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 乌斯特基努马布是一种治疗性抗体,向IL-12和IL-23.
• 评估像ustekinumab这样的单克隆抗体的效应器功能需要强大的基于细胞的测定.
• U937细胞系表达较低水平的IL-12,因此需要优化以用于ADCC试验中的细胞.

研究的目的:

• 开发和验证基于U937细胞的替代试验,用于评估抗体依赖细胞中介细胞毒性 (ADCC).
• 通过优化试验来评估乌斯特基努马布的ADCC效应器功能.
• 为了将ustekinumab的ADCC活性与trastuzumab的ADCC活性进行比较,这是已知的阳性对照.

主要方法:

• 用IFN-γ和LPS刺激U937细胞以诱导IL-12的过度表达.
• 流细胞计和试蓝排除被用于量化IL-12表达和评估细胞活力.
• 一个基于生物发光的记者平台与Jurkat衍生效应细胞被用来测量ADCC活动.

主要成果:

• 仅用25 ng/mL的IFN-γ刺激有效地诱导了U937细胞中一致的IL-12表面过度表达.
• 优化的U937细胞系统被证明是可靠的评估ADCC.
• 乌斯特基努马布在开发的试验中没有诱导可测量的ADCC活性,与特拉斯图祖马布不同.

结论:

• 优化的U937细胞为ADCC试验提供了有效的模型.
• 乌斯特基努马布的作用机制似乎主要是通过中和IL-12和IL-23,而不是FcγRIIIa介导的细胞毒性.
• 该研究阐明了乌斯特基努马布的功能机制,将其与依赖ADCC的抗体区分开来.