对于白性疾病病毒的便携式分子诊断:为全球监测开发逆转录绝缘同热PCR (RT-iiPCR)
Chricel Lattao1, Cheng-Chen Hsieh2, Marie Christine M Obusan1
1Institute of Biology, College of Science, University of the Philippines Diliman, Quezon City, Philippines, upd.edu.ph.
Transboundary and emerging diseases
|February 26, 2026
概括
一种新的便携式测定鱼病菌病毒 (CeMV) 能够在资源有限的环境中进行有效的监测. 这种现场准备的反转录隔离异热PCR (RT-iiPCR) 试验可以准确地检测鱼和海豚组织中的CeMV.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 野生动物疾病监测 野生动物疾病监测
背景情况:
- 鱼病菌病毒 (CeMV) 在海洋哺乳动物中引起显著的死亡事件.
- 目前的监测方法受到实验室能力的限制,特别是在偏远地区.
- 对于CeMV,需要快速,可在现场部署的诊断工具.
研究的目的:
- 开发和验证用于CeMV检测的便携式反转录隔离异热PCR (RT-iiPCR) 试验.
- 评估试验的分析灵敏度,组织中的临床灵敏度,以及与RT-qPCR的一致性.
- 评估在资源有限的现场条件下使用试验的可行性.
主要方法:
- 开发一种便携式RT-iiPCR测定方法,针对CeMV的保存P基因部分.
- 使用合成RNA进行分析性能测试以确定检测极限 (LOD95).
- 在鱼大脑和肺组织中的临床敏感性评估,使用尖端实验和与RT-qPCR的比较.
- 评估一个双重测试,包括一个过程控制 (B2M).
主要成果:
- RT-iiPCR测定显示出高分析灵敏度,LOD95为139个副本/μL.
- 单复式RT-iiPCR保持了100%的阳性,约为Ct 33,表明模板稀缺性的稳定性.
- 在低复制面板中,RT-iiPCR和RT-qPCR之间观察到实质性的一致性 (κ=0.68-0.76),在大脑中具有非常好的一致性.
- 该试验成功地检测到了28年的档案组织中5个CeMV血统.
结论:
- 开发的便携式RT-iiPCR检测仪是CeMV检测的敏感和可靠的工具.
- 它的设计,包括冷化试剂和紧硬件,支持在具有挑战性的现场环境中部署.
- 这种测试可以显著提高跨境CeMV监测,促进快速诊断,并为死亡事件提供早期警告.
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