在血清中使用LC-MS/MS与衍生和脂质去除过的24,25-二氧维生素D₃的量化

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 内分泌学 在内分泌学.

背景情况:

• 准确的维生素D代谢评估对于骨健康,平衡以及理解更广泛的生理作用至关重要.
• 虽然25-基维生素D3 (25(OH) D3) 是常规测量,低丰度的24,25-二基维生素D3 (24,25(OH) 2D3) 提供了对维生素D代谢的补充见解.
• 量化24,25(OH) 2D3在分析上具有挑战性,需要高度敏感和选择性的方法,如LC-MS/MS.

研究的目的:

• 开发和验证一种可靠的液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法,用于量化人类血清中的24,25(OH) 2D3.
• 通过计算维生素D代谢物比率 (VMR) 来改进对维生素D充足度和代谢的评估.
• 为与维生素D代谢变化相关的疾病提供可靠的生物标志物.

主要方法:

• 开发和验证使用动态多重反应监测 (dMRM) 和样本衍生物化的LC-MS/MS方法.
• 使用脂质去除过来最大限度地减少矩阵效应.
• 该方法涉及4--1,2,4-triazoline-3,5-dione (PTAD) 衍生,以提高灵敏度.

主要成果:

• 该试验表现出极好的线性 (R2 = 0.9982) 和在试验内和试验间的精度低于14%.
• 量化极限 (LOQ) 为0.64 ng/mL,DEQAS样品的回收率在80%至118%之间.
• PTAD衍生实现了100倍的灵敏度增加,使该方法适合临床和研究实验室.

结论:

• 开发的LC-MS/MS方法提供了24,25(OH) 2D3的精确量化,补充了常规的25(OH) D3分析.
• 该方法支持确定维生素D代谢物比率 (VMR),以便更准确地评估维生素D状态.
• 经过验证的试验作为可靠的生物标志物用于诊断和管理与维生素D代谢相关的疾病.