使用常规,成像和纳米尺度流细胞计技术进行支气管上皮细胞衍生细胞外囊泡分析

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 来自支气管上皮细胞的细胞外囊 (EV) 在呼吸道免疫反应和呼吸道疾病调节中发挥关键作用.
• 电动汽车含有影响上皮质炎症信号的生物活性载荷.
• 传统的EV分析方法包括纳米粒子跟踪分析,西式涂抹和电子显微镜.

研究的目的:

• 评估先进的流动细胞计 (FC) 技术对分析上皮细胞衍生的EVs的实用性.
• 描述使用不同的FC平台从原始人类支气管上皮细胞特征EVs的方法和考虑.
• 为EV分析提供有关选择合适FC技术的指导.

主要方法:

• 来自人类原发性支气管上皮细胞的超级细胞被素-AM和光结合的四松胺抗体染色.
• 在CytoFLEX S,ImageStream X MKII和CytoFLEX纳米流量细胞计上分析了EV.
• 使用NIST可追溯粒子或合成EV标准进行尺寸校准;使用微球评估抗体检测极限.

主要成果:

• 所有经过测试的FC技术都成功地大小,计数和表型化了上皮细胞衍生的EV.
• 对于每个FC平台,观察到不同的尺寸敏感性和特定考虑因素.
• 该研究表明了FC在没有大量净化的情况下分析EV异质性的潜力.

结论:

• 流细胞计提供了一个单一平台解决方案,用于快速,全面分析上皮细胞衍生的EVs.
• 这些发现为研究人员选择用于EV表征的FC仪器提供了实际指导.
• 对于剖析表皮EVs在呼吸道免疫和炎症中的作用,FC技术具有显著的前景.