酶DisoNNex和TrypLE可以互换,作为脂肪组织衍生中酶体 stromal 细胞的收获剂

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物技术是生物技术.
• 再生医学是一种再生医学.

背景情况:

• 脂肪组织衍生中酶体 stromal 细胞 (ASCs) 对细胞疗法至关重要.
• 有效和一致的制造工艺,包括酶性细胞解离,对于ASC疗法至关重要.
• DisoNNex是一种新的基米素基酶,为ASC解离提供符合良好制造实践 (GMP) 的替代方案.

研究的目的:

• 评估DisoNNex对ASC特性和质量的影响.
• 要将DisoNNex的性能与行业标准酶进行比较,请使用TrypLE Select.
• 评估DisoNNex对于符合GMP的ASC制造的适用性.

主要方法:

• 通过时间间隔显微镜对ASC解离动力学进行DisoNNex与TrypLE的比较.
• 在两个通道中使用两个酶从五个捐赠者的ASC收获.
• 评估了免疫类型,细胞亡,VEGF分泌,IDO表达,淋巴细胞抑制,并进行了多组组 (RNA测序,蛋白组,代谢组,脂组组).

主要成果:

• 与TrypLE相比,DisoNNex在15μg/mL的剂量显示出相当的解离动力学,并保持了ASC的活力.
• 在功能性测定或多组体分析 (基因表达,蛋白质,代谢物,脂质) 中没有发现显著差异.
• 多奥米克因子分析显示,没有基于所使用的解离酶进行聚类.

结论:

• 对于ASC收获,DisoNNex是TrypLE的一个可行的替代品,产生相当的细胞质量和数量.
• 这些发现支持DisoNNex在符合GMP的ASC疗法制造方面的潜力.
• 建议在已建立的生产工艺中进行进一步的可比性研究.