在小鼠中使用不同的中枢神经系统导向输送方法后,AAV9驱动的运动神经元转导的比较

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 基因治疗 基因治疗
• 病毒载体传递 病毒载体传递

背景情况:

• 基因疗法为以前无法治疗的疾病提供了潜在的治疗方法.
• 腺相关病毒血清型9 (AAV9) 对运动神经元 (MN) 呈现强烈的热带性,使其成为运动神经元疾病基因治疗的候选者.
• 基因疗法载体的全身传递可以导致免疫性和非目标效应,突出显示本地化中枢神经系统 (CNS) 传递的需要.

研究的目的:

• 为了比较不同中枢神经系统导向的传递方法在体内对AAV9介导的运动神经元转导的有效性.
• 为了评估AAV9对脊髓,脑干和皮质中运动神经元和星球细胞的热带性,遵循不同的传递路径.
• 为了评估目标外转导和外围组织中的病毒基因组副本.

主要方法:

• 野生类型的产后小鼠通过内 (ICM) 或脑内内 (ICV) 给药,获得表达增强GFP的AAV9载体.
• 运动神经元和天体细胞转导用免疫组织化学在分娩后4周量化.
• 病毒基因组拷贝数通过在各种组织中的qPCR来确定.

主要成果:

• 所有测试的中枢神经系统输送方法都在腰椎脊髓中实现了高运动神经元转导 (>68%).
• 单边ICV输送产生了最高和最一致的MN转导 (89%±3%) 与最小的外围病毒载荷.
• ICV输送导致了星细胞转导的增加,特别是在皮质中,而ICM输送显示了较少的星细胞转导.

结论:

• 由中枢神经系统指导的AAV9传递有效地传导腰脊髓和脑干中的运动神经元,但不是运动皮质.
• 单边ICV输送提供了高,一致的运动神经元转导和减少非目标效应的最佳平衡.
• 如果最大限度地减少天体细胞转导是优先考虑的,ICM交付可能是更好.