一个没有培养的基于脂组学的查测试,以检测尿病原体

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 分析化学 分析化学
• 临床诊断 临床诊断 临床诊断

背景情况:

• 尿路感染 (UTI) 需要快速诊断以获得有效的抗菌药物治疗.
• 目前的无培养方法,如快速脂质分析技术 (FLAT),对格拉姆阴性细菌具有很高的敏感性,但对格拉姆阳性细菌的敏感性较低.
• 显著的脂质特征 (脂质A为克拉姆阴性,心脂蛋白为克拉姆阳性) 是FLAT的关键目标.

研究的目的:

• 提高FLAT试验的灵敏度,用于检测尿样中的グラム阳性细菌.
• 开发一种统一的,快速的,不需要培养的诊断工作流程,用于病原体的格拉姆阴性和格拉姆阳性.

主要方法:

• 尿液样本先用酶进行预处理,以降解细菌酸糖层,促进心脏脂素的释放.
• 用不同度的酶来评估阳性细菌和大肠杆菌的检测极限 (LOD).
• 优化的方法在76个尿样的临床队列上得到了验证.

主要成果:

• 通过每1毫升尿液使用100μg的lyszyme,在60分钟的潜伏期内,获得了对阳性细菌的最佳敏感性.
• 莱索酶预处理增加了心脏脂蛋白LOD的100倍,实现了95%的グラム阳性细菌检测率.
• 增强的FLAT测定也改善了脂类A的信号噪声比,并检测了多微生物感染.

结论:

• 用酶增强的FLAT提供了一种快速的,无培养的方法,可以直接从尿液中检测出格拉姆阴性和格拉姆阳性尿病原体.
• 这种统一的工作流大大减少了90%以上的分析周转时间.
• 优化的测定方法适用于高通量临床实验室,提高了尿路感染诊断效率.