对于冷小鼠肠道组织的代间接免疫光成像的协议
Shuji Matsuguchi1, Aiyan Yau1, Ayaka Omori1
1Laboratory for Quantitative Biology of Cell Fate Decision, Center for Biosystems Dynamics Research, RIKEN, 2-2-3, Minatojima-minamimachi, Chuo-ku, Kobe 650-0047, Japan.
STAR protocols
|March 9, 2026
概括
我们为冷组织开发了一种具有成本效益的代间接免疫光成像 (4i) 协议. 这种方法允许在单个段中多重检测10个标记物,用于定量单细胞分析.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 历史学 历史学 历史学
背景情况:
- 组织部分的多重成像对于理解细胞异质性至关重要.
- 现有的方法通常需要专门的设备或复杂的抗体结合.
研究的目的:
- 提出一个具有成本效益和可访问的协议,用于冷组织的代间接免疫光成像 (4i).
- 为了使多个标记物在单个组织部分中的多重检测.
主要方法:
- 开发了一种用于冷小鼠肠道组织的代间接免疫光成像 (4i) 的协议.
- 使用标准试剂进行样本制备和抗体化,避免抗体结合.
- 建立了一个工作流程,需要两天的设置时间和一天的成像时间.
- 集成了一个基于MATLAB的管道,用于定量单细胞分析.
主要成果:
- 在五轮成像中,在单个冷组织部分内实现了10个标记的多重检测.
- 通过避免专用设备,证明了协议的成本效益和可访问性.
- 通过专门的MATLAB管道实现了定量单细胞分析.
结论:
- 提出的Cryo-4i协议为冷组织的多重成像提供了一个可访问和具有成本效益的解决方案.
- 这种方法促进了详细的单细胞分析,促进了免疫学和细胞生物学方面的研究.
- 该协议的效率允许在单个部分进行全面的标记器检测.
