人类多能干细胞无动物成分分化成巨细胞的分化
L van den Berk1, Nikola Z Popović1, Renée H Wijmenga2
1Department of Anatomy and Embryology, Leiden University Medical Center, Leiden 2300RC, the Netherlands; The Novo Nordisk Foundation Center for Stem Cell Medicine (reNEW), Leiden University Medical Center, Leiden 2300RC, the Netherlands.
这项研究开发了一种完全没有动物成分的方法来产生人类多能干细胞衍生的巨细胞. 这种方法提高了体外免疫学研究和药物测试的可重复性,与3R原则保持一致.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 再生医学是一种再生医学.
背景情况:
- 巨细胞对于免疫和组织修复至关重要.
- 人类多能干细胞 (hPSC) 衍生的巨细胞比初级细胞具有优势,但通常依赖于动物衍生的成分.
- 像FBS和Matrigel这样的动物衍生成分引入了变异性并阻碍了可复制性.
研究的目的:
- 开发一种完全没有动物成分的协议,用于从hPSCs产生巨细胞.
- 用复合人体维特罗内克丁或拉米宁-521替代动物衍生成分 (FBS,Matrigel).
- 为体外免疫学应用建立一个可靠和可重复的方法.
主要方法:
- 使用定义的,无异种条件来进行hPSC分化.
- 用复合人体维特龙菌素或拉米林-521代替胎儿牛血清 (FBS) 和Matrigel.
- 评估了前体巨细胞的产生,分化为亚型,以及功能性检测 (表面标记物,细胞因子分泌,细胞化).
- 在拉米宁-521上实施单细胞播种,以进一步提高可复制性.
主要成果:
- 在维特罗涅克丁和拉米宁-521基质上有效生成前体巨细胞.
- 成功分化为促炎和抗炎的巨细胞亚型.
- 大细胞表现出预期的表型和功能特征,包括细胞因子概况和细胞活性.
- 在拉米宁-521上单细胞播种保持了巨细胞的特征,提高了可再生性.
结论:
- 建立了一个强大的,完全没有动物成分的协议,用于从hPSCs生成免疫能力强的髓状细胞.
- 该协议在多个独立的hPSC线路上有效,并支持3R原则.
- 该方法促进了用于免疫学和药物发现的标准化,可复制的体外模型的开发.
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