通过核糖蛋白突变扫描识别的植物和人类细胞的工程TnpB基因组编辑器
Brittney W Thornton1,2, Rachel F Weissman1,2, Jorge E Rodriguez1,2
1Department of Molecular and Cell Biology, University of California, Berkeley, Berkeley, CA, USA.
Nature biotechnology
|March 12, 2026
概括
研究人员通过发现激活突变来增强TnpB酶,这是基因组编辑的一个有前途的工具. 工程变体在植物和人类细胞中显著增加了编辑活动,超过了其他紧编辑器.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
- 遗传学 遗传学 是一个
背景情况:
- TnpB酶是RNA引导的内核酶,与 prokaryotic 转位子联系在一起.
- 它们的小尺寸和与CRISPR-Cas12的关系表明基因组编辑潜力.
- 大多数TnpB酶表现出有限的基因编辑能力.
研究的目的:
- 在TnpB核糖蛋白中绘制序列功能关系.
- 为了确定增强TnpB内核酶活性的突变.
- 为基因组编辑应用开发改进的TnpB变体.
主要方法:
- 对TnpB核糖蛋白进行深度突变扫描.
- 构建和选激活突变的组合图书馆.
- 在人体细胞中测试工程TnpB变体,尼科蒂亚娜本塔米亚娜,胡和大米.
主要成果:
- 综合的序列功能格局揭示了TnpBRNA和蛋白质中的激活突变.
- 确定了两个增强的TnpB变体,大大提高了编辑效率.
- 工程变体在N. benthamiana中实现了高达55%的插入/删除频率,比野生类型增加了50倍.
结论:
- 确定了TnpB内核酶活性的关键调节元素.
- 潜在的TnpB活性可以通过向突变来解锁.
- 增强的TnpB变体代表了紧的基因组编辑工具的重大进步.
