使用通过表位预测产生的抗内部素抗体检测Listeria monocytogenes
Mariya Divanshi1, Jitesh Tarak1, Shreya Saha1
1Microbiology Section, National Referral Centre for Milk Quality and Safety, ICAR-NDRI, Karnal 132001, Haryana, India; Microbial Biosensors, Food Safety and Quality Assurance Lab, Dairy Microbiology Division, ICAR-NDRI, Karnal, 132001, Haryana, India.
Journal of microbiological methods
|March 12, 2026
概括
开发针对Internalin A (Inl A) 和Internalin B (Inl B) 的新抗体使得乳制品中Listeria monocytogenes的快速和特定免疫检测成为可能. 这种以表位为指导的策略增强了食品安全监督.
科学领域:
- 食品科学 食品科学 食品科学
- 微生物学 微生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 单细胞菌菌是一种重要的食物传播病原体,需要在乳制品系统中采用敏感的检测方法.
- 目前的监控方法需要提高速度和特异性.
研究的目的:
- 开发针对Listeria monocytogenes检测的Internalin A (Inl A) 和Internalin B (Inl B) 的表位导向抗体.
- 将这些抗体应用于基于ELISA的测定中,以提高乳制品基质的特异性和灵敏性.
主要方法:
- 在 silico 预测中,从 Inl A 和 Inl B 表面蛋白中确定了抗原.
- 子被用这些免疫,以产生多克隆抗体.
- 抗体被净化并以点滴和ELISA格式进行测试,包括双位三明治ELISA.
主要成果:
- 特异性抗体显示出高的结合亲和度和标位.
- 在ELISA检测中,光学密度与细菌度之间存在线性相关性 (R2=0.982),检测极限为4.30±0.02CFU/ml.
- 双位子三明治ELISA实现了4log CFU/ml的检测极限,区分了Listeria物种并检测了添加剂的牛奶样本中的低水平.
结论:
- 预测Epitope的Inl A/Inl B抗体可提供对病原性Listeria物种的可靠歧视.
- 该战略为食品传播病原体查和牛奶安全监测提供了一个敏感和特定的平台.
