为将小鼠肠表皮解离为可活单细胞的优化协议
Ni Zhao1, Peiling Geng1, Yong Ge1
1Department of Microbiology, Immunology & Molecular Genetics, University of Texas Health San Antonio, San Antonio, TX, USA.
STAR protocols
|March 13, 2026
概括
这项研究介绍了一种新的协议,用于使用TrypLE Express和Dispase II解离小鼠肠上皮细胞 (IEC). 该方法有效地恢复数百万可行的IECs,包括罕见的肠染色胺 (EC) 细胞,用于功能分析.
科学领域:
- 胃肠道学和细胞生物学
- 微生物组研究 微生物组研究
- 主机与饮食之间的相互作用
背景情况:
- 肠上皮细胞 (IECs) 对宿主微生物和宿主饮食相互作用至关重要.
- IECs由多种不同类型的细胞组成,使得功能配置文件具有挑战性.
- 了解IEC异质性是破译肠道健康和疾病的关键.
研究的目的:
- 开发并提出一个强大的协议,用于分离小鼠肠表皮.
- 为了使可活的肠上皮细胞 (IECs) 能够有效地恢复下游分析.
- 为了促进罕见的IEC种群的隔离,如色素 (EC) 细胞.
主要方法:
- 一个使用TrypLE Express和Dispase II进行组织分离的新方案.
- 关于小鼠肠道组织采集,密室隔离和酶性消化的详细步骤.
- 优化酶性消化以最大限度地恢复可行的单个IECs.
主要成果:
- 成功地解离了小鼠肠表皮,产生了数百万个可行的IEC.
- 在隔离罕见细胞群体,特别是肠染色胺 (EC) 细胞方面表现出效率.
- 协议提供了一种可扩展的方法,用于从小鼠肠道中隔离IEC.
结论:
- 本协议提供了一种可靠的方法,用于获得大量可行的小鼠IEC.
- 这种技术对于研究罕见的细胞类型及其功能特别有价值.
- 能够在宿主-微生物-饮食相互作用中对肠上皮质异质性的高级功能分析.
