乳酸脱酶异酶:在高酶度下进行进一步的动力学研究

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 酶学 是一种酶学.
• 细胞的新陈代谢

背景情况:

• 乳酸脱酶 (LDH) 在细胞代谢中起着至关重要的作用,将酸盐转化为乳酸盐.
• LDH活性受尼古丁胺腺因二核酸 (NAD) 等辅因子的调节,并且可以受到各种细胞组件的影响.
• 了解LDH调节对于诊断与细胞代谢改变相关的疾病至关重要.

研究的目的:

• 研究常见细胞内蛋白对乳酸脱酶 (LDH) 异型 (LDH-1和LDH-5) 的活性和抑制的影响.
• 为了确定细胞内蛋白质是否影响LDH,NAD和pyruvate之间的相互作用.
• 评估评估细胞内LDH抑制现有模型的生理相关性.

主要方法:

• 在体外实验中,涉及净化的LDH异型 (LDH-1,LDH-5),尼古丁胺胺氨基二核酸 (NAD) 和pyruvate.
• 用各种细胞内蛋白质化LDH,包括甘甲基-3-酸盐脱酶,马拉酸脱酶和专蛋白.
• 测试以测量LDH活性,抑制和三元复合体形成.

主要成果:

• 发现常见的细胞内蛋白质,如甘甲基-3-酸盐脱酶,酸盐脱酶和白蛋白,与LDH竞争NAD.
• 这种竞争有效地保护了LDH-1和LDH-5不受pyruvate的抑制,并防止了三元复合体的形成.
• 这些竞争性蛋白质的存在使得仅依赖LDH,NAD和酸盐的模型在估计细胞内LDH抑制时不生理.

结论:

• 细胞内蛋白质通过与NAD竞争,显著影响LDH活性和抑制.
• 估计细胞内LDH抑制的现有模型是非生理的,因为忽略了竞争的细胞内蛋白质.
• 进一步的研究应该考虑内源蛋白在体内LDH活性调节中的作用.