静态阶段L细胞悬浮培养中的结构,活力和乳酸脱酶

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物化学 生物化学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 悬浮培养L细胞在饥饿条件下容易丧失生存能力.
• 维持高细胞密度对于长时间的细胞培养应用至关重要.

研究的目的:

• 研究食策略对L细胞培养活力和代谢活动的影响.
• 在高密度静止培养中描述乳酸脱酶 (LDH) 和碳水化合物利用的行为.

主要方法:

• 饥饿与定期养的L细胞悬浮培养的比较.
• 分析细胞活力,结构完整性和关键细胞成分.
• 乳酸脱酶异酶的电泳分析.
• 测量特定的酶活性和碳水化合物利用模式 (乳酸盐生产/消费).

主要成果:

• 饥饿的文化显示了短暂的平原,随后迅速失去生存能力.
• 定期养,未经稀释的培养物保持高细胞密度和活力,没有结构变化.
• L细胞拥有一个单个LDH异酶,类似于LDH-5.
• 高密度静止培养物表现出特定LDH活性增加了十倍.
• 观察到碳水化合物利用的双相模式,包括乳酸生产然后消费.

结论:

• 在悬浮培养中,定期养对于维持L细胞活力和高密度至关重要.
• 高密度静止培养表明增强的特定乳酸脱酶活性和独特的代谢调节.
• 观察到的代谢模式表明,在密集的细胞群中,能量的管理具有适应性机制.