艾滋病相关逆转录病毒的分子克隆

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 分子生物学分子生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 逆转录病毒与各种鸟类和哺乳动物疾病有关.
• 人类获得性免疫缺陷综合征 (艾滋病) 的特征是免疫系统崩和机会性感染.
• 逆转录病毒,包括淋巴腺病相关病毒 (LAV),人类T细胞淋巴细胞病毒 (HTLV-III) 和艾滋病相关逆转录病毒 (ARV-2),与艾滋病有关.

研究的目的:

• 为了描述艾滋病相关逆转录病毒 (ARV-2) 的基因组.
• 在受感染的人类T细胞系中研究ARV-2的分子形式.

主要方法:

• 从受感染的细胞培养基中净化病毒.
• 使用凝电泳法识别病毒RNA基因组大小.
• 从病毒RNA中合成互补DNA (cDNA) 探针.
• 使用cDNA探针检测感染细胞中的病毒DNA形式 (圆形和前病毒).
• 从受感染的细胞中构建一个DNA库.
• 对含有前病毒插入物的复合菌体DNA的分析.
• 限制内核酶消化以比较ARV分离物.

主要成果:

• 在ARV-2病毒中确定了大约9千基 (kb) 的病毒RNA基因组.
• 一个cDNA探测器在感染细胞中检测到圆形DNA分子和前病毒形式.
• 重组菌体含有9.5kb的前病毒DNA,其中一些与EcoRI站点相对呈现变异的病毒DNA.
• 在不同艾滋病患者的三个ARV分离物中观察到限制位多态性.

结论:

• 这项研究成功地识别和表征了ARV-2的RNA基因组.
• 提供了感染细胞中ARV-2的循环和前病毒DNA形式的证据.
• 在ARV分离物中证明了基因变异,这表明病毒进化的潜力.