相关实验视频

Updated: May 5, 2026

In Vitro Synthesis of Modified mRNA for Induction of Protein Expression in Human Cells

In Vitro Synthesis of Modified mRNA for Induction of Protein Expression in Human Cells

Published on: November 13, 2014

在体外合成的β-环球蛋白基因的放大和表征

T Maniatis, S G Kee, A Efstratiadis

|June 1, 1976

概括

研究人员从mRNA合成和克隆了子的全长β-环球蛋白DNA. 这准确地复制了该基因,使其能够在没有更改的情况下进行放大,以便进一步研究.

科学领域:

分子生物学分子生物学
生物化学生物化学
遗传学是一个遗传学.

背景情况:

子球蛋白mRNA作为合成互补DNA (cDNA) 的模板.
精确的合成和特定基因序列的放大对于分子生物学研究至关重要.

研究的目的:

在实验室中从子全球蛋白mRNA合成全长,双链的全球蛋白DNA.
通过限制内核酶映射来评估合成DNA的真实性.
通过将其克隆成等离子体载体来放大合成环球蛋白DNA.

主要方法:

在实验室中合成子全球蛋白mRNA的双链球蛋白DNA.
限制内核酶映射用于验证DNA序列的准确性.
将合成环球蛋白DNA插入等离子体pMB9中,采用多样性dA-dT尾巴.
大肠杆菌的转化和积极克隆的识别使用殖民地杂交与放射性标记的mRNA探针.

主要成果:

限制映射证实了合成环球蛋白DNA是β-环球蛋白mRNA的忠实副本.
在没有序列重排的情况下,合成球蛋白DNA在大肠杆菌中成功放大.
合成和克隆的DNA都含有完整的编码序列,并附带β-环球蛋白基因的未翻译区域.

结论:

可实现全长子β-环球蛋白DNA的可靠体外合成.
在大肠杆菌中克隆和放大这种合成DNA是有效的,并保持序列完整性.
克隆的DNA为研究β-环球蛋白基因结构和功能提供了有价值的工具.

更多相关视频

CRISPR-Mediated Reorganization of Chromatin Loop Structure

CRISPR-Mediated Reorganization of Chromatin Loop Structure

Published on: September 14, 2018

Rapid, Enzymatic Methods for Amplification of Minimal, Linear Templates for Protein Prototyping using Cell-Free Systems

Rapid, Enzymatic Methods for Amplification of Minimal, Linear Templates for Protein Prototyping using Cell-Free Systems

Published on: June 14, 2021

相关概念视频

Transgenic Organisms

Transgenic Organisms

Reporter Genes

Reporter Genes

Reporter genes are a type of protein-coding gene that are often tagged to a gene of interest. Once inside a target cell, reporter genes usually produce visually identifiable characteristics like fluorescence and luminescence when expressed along with the gene of interest. Thus, reporter genes “report” the presence or absence of genes of interest in an organism, determine the gene expression pattern, or track the physical location of a DNA segment or protein in the cell.