与酵母酒精脱酶II的构成表达相关的可转移元素

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 酵母遗传学 酵母遗传学
• 酵素法规 酵素法规

背景情况:

• 酵母中的ADR2基因编码了可抑制葡萄糖的酒精脱酶II (ADHII).
• 了解ADHII的调节对于研究酵母中的基因表达至关重要.
• 构成性突变可以改变正常的代谢途径.

研究的目的:

• 调查酵母ADR2基因中cis-主导的组成突变的遗传基础.
• 确定导致ADHII葡萄糖抑制丧失的分子机制.
• 描述影响ADR2基因表达的突变的性质.

主要方法:

• 在转化酵母中通过补充进行基因隔离.
• 来自突变酵母菌株的染色体DNA的限制酶分析.
• 使用克隆ADR2DNA进行杂交探测.
• 从构成性突变物中克隆ADR2基因片段.
• 异质双重分析和南方涂抹.

主要成果:

• 在九种组成ADR2突变中,有七种突变在编码区域的5'端附近出现插入.
• 四个插入与Ty1可转移元素模式相匹配;其他插入显示了变化.
• 所有插入都与ADR2基因相对相同的方向.
• 克隆插入序列含有中度重复的DNA,并混合到多个基因组位点.
• 可转换的元素插入被确定为构成性ADHII表达的原因.

结论:

• 在ADR2基因的5'末端附近插入可移植元素导致ADHII的构成性表达.
• 这种插入机制是影响ADHII的cis-dominant构成突变的最常见原因.
• 可转移元素在调节基因表达和在酵母中产生突变方面发挥着重要作用.