通过哺乳动物甲基酶而不是细菌甲基酶甲基化的逆转录病毒基因组是非传染性的

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 表观遗传学 在表观遗传学中,表观遗传学是指表观遗传学.
• 基因规则 基因规则

背景情况:

• 人们越来越认识到DNA甲基化在真核生物基因表达中的作用.
• 以前的研究表明甲基化和基因表达之间存在联系,但没有确定特定的残留物.
• 细菌DNA序列特异性甲基酶对基因表达有不同的影响.

研究的目的:

• 为了研究DNA甲基化对基因表达的影响,独立于序列特异性.
• 为了确定非特异性C-G二核酸的甲基化是否会影响生物活性.

主要方法:

• 在实验室中用大鼠肝酶对所有C-G二核酸在莫洛尼小鼠白血病病毒 (M-MuLV) 预病毒基因组克隆中的甲基化.
• 转染试验用于测量甲基化M-MuLVDNA的生物活性 (传染性).
• 使用非序列特异性大鼠肝酶的甲基化效应与在特定HpaII位点的甲基化效应的比较.
• 通过在受体细胞中使用5-azacytidine治疗逆转甲基化诱导的无活化.

主要成果:

• 鼠肝酶对M-MuLVDNA中所有CG二核酸的甲基化,使病毒的生物活性减少了三倍以上.
• 同一个DNA中35个HpaII位点的完全甲基化对生物活性的影响微乎其微.
• 由老鼠甲基酶引起的失活是可逆的5-azacytidine,恢复病毒基因组的生物活性.

结论:

• 超出受限制酶识别的C-G二核酸的DNA甲基化在基因表达中起着至关重要的作用.
• 非序列特异性甲基化显著影响病毒基因组的生物活性.
• 甲基化诱导的沉默的可逆性表明了一个动态的表观遗传调节机制.