结构和表达一个互补的DNA的核编码的前体的人类线粒体ornitine transcarbamylase的结构和表达

科学领域:

• 线粒体生物学 线粒体生物学
• 分子遗传学 分子遗传学
• 酶学 是一种酶学.

背景情况:

• 线粒体蛋白质在细胞质中合成,作为前体.
• 这些前体含有指导线粒体进口的N端领导序列.
• 这些领导序列的精确结构和功能对于线粒体生物生成至关重要.

研究的目的:

• 为了阐明人类甲酸转糖酶 (OTC) 前体的完整初级结构.
• 分析OTC的N终端领导序列.
• 在异质系统中评估克隆人类OTCcDNA的功能表达.

主要方法:

• 从克隆的互补DNA (cDNA) 序列中推断出主要结构.
• 对N端领导序列和切割部位的分析.
• 使用SV40调节元件在HeLa细胞中OTCcDNA的功能表达.

主要成果:

• 确定了人类OTC前体的完整初级结构.
• N终端领导长32个氨基酸,富含氨酸,在谷氨酸和氨酸之间分裂.
• 在HeLa细胞中表达的OTC显示出前体和成熟形式,具有可检测的酶活性.

结论:

• 人类OTC前体的推断结构为线粒体蛋白质进口提供了洞察力.
• 成熟的OTC序列显示与细菌碳氨基转移酶的同质性,表明进化保护.
• 功能表达证实了克隆的OTCcDNA及其前体加工的生物活性.