在复原酶多酶复合体中,抑制剂证据表明了全相互作用.

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 此前已经确定了来自S阶段中国仓鼠胚胎纤维细胞 (CHEF/18细胞) 的核分数 ("复制酶"),其中含有用于DNA生物合成的酶.
• 这种复制酶部分包括~25纳米的球形颗粒,这表明多酶复合体用于 de novo DNA 合成.

研究的目的:

• 为了调查thymidylate synthase与DNA合成复合体内的其他酶的功能关联.
• 为了探索特定酶抑制剂对完整细胞中胺酸合成酶活性的影响,与可溶性提取物相比.

主要方法:

• 使用的特定抑制剂:基尿素 (核核酸减少酶),新生物素 (毒素酶) 和阿菲迪科林 (DNA聚合酶α).
• 评估了在完整的S相CHEF/18细胞中抑制胺酸合成酶活性.
• 在相同的抑制条件下,在可溶性细胞提取物中比较了胺酸合成酶活性.

主要成果:

• 氧尿素,新生物素和阿菲迪科林在完好无损的CHEF/18细胞中抑制了提米基酸合成酶活性.
• 这些抑制剂没有影响溶性细胞提取物中的硫基酸合成酶活性.
• 证明了thymidylate synthase与其他DNA生物合成酶的功能关联.

结论:

• 结果表明,多酶DNA合成复合体的子单元之间存在性相互作用.
• 这些相互作用是由完整细胞中的特定酶抑制剂调节的.
• 支持用于DNA复制的协调,多酶复合物的模型.