在野生类型和突变细胞中对类固醇激素受体基因和mRNA的表征

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 遗传学 是一个
• 内分泌学 在内分泌学.

背景情况:

• 类固醇激素的作用是由调节基因表达的细胞内受体调节的.
• 葡萄糖皮质体受体 (GR) 是一个约94K的蛋白质,参与转录调节.
• GR与促进体附近的DNA结合,作为一种依赖激素的转录增强剂.

研究的目的:

• 为了克隆大鼠肝脏葡萄糖皮质体受体的补充DNA (cDNA).
• 描述编码葡萄糖皮质体受体的基因及其转录.
• 为了研究突变细胞系中受体mRNA的变化.

主要方法:

• 使用GR特异性抗体来隔离受体信使RNA (mRNA) 的多体免疫丰富.
• 从丰富的mRNA中克隆2.6千基基 (kb) 的GRcDNA.
• 分析GR基因及其转录在老鼠和小鼠细胞中的分析,包括突变系.

主要成果:

• 隔离了一种2.6kb的cDNA,用于大鼠肝脏的葡萄糖皮质体受体.
• 葡萄糖皮质体受体是由一个单拷贝基因编码的,产生6kb左右的转录.
• 具有缺陷GR功能的突变细胞系表现出改变的GR mRNA水平和完整性.

结论:

• 克隆GRcDNA为研究GR基因调节提供了一个工具.
• 这些发现阐明了葡萄糖皮质体受体功能及其调节的分子基础.
• 对GR基因和转录的表征对于理解与受体相关的细胞缺陷至关重要.