扫描电子显微镜的新方法用于成像生物组织

科学领域:

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• 显微镜的使用方法
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背景情况:

• 扫描电子显微镜 (SEM) 对于组织学样本是有限的,因为表面敏感的二次电子成像.
• 传统的SEM成像扭曲了加工和切割组织学切口的实际结构.
• 使用背散电子 (BSE) 的现有方法需要不透明的基板,防止相关光显微镜.

研究的目的:

• 开发一种用于在SEM中成像组织学切口的方法,其分辨率优于光显微镜.
• 为了使同一个组织学部分的相关成像使用光显微镜和SEM.
• 克服在SEM中基于表面的成像对生物组织的局限性.

主要方法:

• 使用标准玻璃显微镜幻灯片发出的阴极发光 (CL) 信号.
• 通过组织学部分使用电子流作为图像信号强度的测量.
• 使用SEM在5-20keV.使用玻璃幻灯片上安装的7微米厚的组织学切片的成像.

主要成果:

• 获得的SEM成像分辨率超过传统光显微镜用于组织学切口的分辨率.
• 证明玻璃幻灯片的阴极光发光与通过样品传递的电子流量成正比.
• 启用了安装在透明玻璃幻灯片上的组织学截面的相关成像.

结论:

• 在SEM中,玻璃安装组织学断面的阴极光发光成像为传统方法提供了有价值的替代方案.
• 这种技术提供了比光显微镜更高的分辨率,并允许与光显微镜图像直接相关.
• 该方法克服了对组织样本的SEM表面依赖成像的局限性.