在大肠杆菌中合成具有人类白细胞干扰素活性的多

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 干扰素 (IF) 对抗病毒反应至关重要.
• 高效地生产IF是生物技术的一个重大挑战.
• 白细胞是产生IF的RNA的来源.

研究的目的:

• 克隆和表达编码人类干扰素 (IF) 的基因.
• 开发一种在微生物系统中产生生物活性IF的方法.
• 描述克隆的IF基因及其表达产物.

主要方法:

• 从人类白细胞中分离出多元ARNA.
• 合成双链cDNA,并将其克隆到E. coli中的pBR322载体中.
• 使用IF mRNA对克隆的杂交查.
• 从细胞提取物中测定生物IF活性.

主要成果:

• 发现了一种具有910个基对插入的克隆,能够与IF mRNA杂交.
• 克隆的插件指导了产生表现出生物IF活性的多的生产.
• 实现了高收益率的IF活动,每克细胞高达1万个单位.

结论:

• 在大肠杆菌中成功克隆和表达人类IF基因.
• 证明一种可行的微生物系统用于生产生物活性干扰素.
• 对用于治疗应用的干扰素大规模生产的潜力.