使用光激活细胞分类来分离表达 H-2Kk 变异的克隆细胞系

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 研究细胞表面蛋白质对于理解细胞功能和免疫反应至关重要.
• 识别和分离具有特定蛋白质改变的细胞具有挑战性,但对研究至关重要.

研究的目的:

• 开发和演示一种用于隔离表达结构改变细胞表面基因产物体细胞变异的新方法.
• 通过失去特定的抗原决定因素来定义的变异性表型的细胞的积极选择.

主要方法:

• 开发一种选策略,针对具有特定抗原决定因素损失的细胞.
• 利用光激活细胞分类 (FACS) 进行有效的细胞群丰富.
• 在体外培养以扩展和分离选定的变异细胞系.

主要成果:

• 成功分离了一个克隆细胞系 (H-2KkS1),表达了一个结构改变的H-2Kk分子.
• 在野生类型群体中,发现了变异H-2Kk分子的变异细胞,频率为10(-5)-10(-6).
• 在三轮FACS选择和随后的体外生长中实现了隔离.

结论:

• 描述的方法提供了一种有效的方法来隔离具有改变细胞表面抗原的体细胞变异.
• 这种技术有助于研究结构修饰的细胞表面分子,如H-2Kk蛋白.
• 这些发现为研究改变细胞表面蛋白质表达的功能后果开辟了道路.