在大肠杆菌中产生生物合成人类胰岛素蛋白质的细胞质纳入体

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 微生物学 微生物学

背景情况:

• 重组DNA技术使细菌能够产生外来蛋白质.
• 大肠杆菌是生产治疗性蛋白质的常见宿主,如人类胰岛素.
• 细胞内蛋白质聚合可以发生在基因工程微生物中.

研究的目的:

• 为了研究人类胰岛素生产工程的大肠杆菌中包含体的形成和特征.
• 为了将包容体的形成与合成的嵌合蛋白质的数量相关联.

主要方法:

• 使用重组DNA技术对大肠杆菌进行基因操纵,以表达人体胰岛素多 (A链,B链,亲胰岛素).
• 细菌细胞的显微镜检查,以识别和量化细胞质纳入体.
• 在细菌细胞中定量化基米蛋白水平.

主要成果:

• 在转基因大肠杆菌中观察到突出的细胞质纳入体.
• 包括体的体积与产生的化学蛋白质量直接相关.
• 在产量高峰时,包容体占细菌细胞体积的20%.

结论:

• 为人类胰岛素合成而设计的大肠杆菌可靠地形成了显著的细胞质纳入体.
• 包容体的形成是化学蛋白质生产水平的直接指标.
• 了解包容体的形成对于优化细菌中的重组蛋白质生产至关重要.