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通过纯化和膜相关蛋白酸酶逆转Raf-1激活
P Dent1, T Jelinek, D K Morrison
1Howard Hughes Medical Institute, University of Virginia, Charlottesville 22908, USA.
Science (New York, N.Y.)
|June 30, 1995
概括
细胞膜中的蛋白质酸酶使Raf-1激酶活性失活. 这种无活化是由三酸瓜诺辛 (GTP) 调节的,并且可以被特定的蛋白质和抑制剂阻断,这表明了对米托基因信号的新型调节机制.
科学领域:
- 细胞信号传递途径 细胞信号传递途径
- 蛋白质激酶调节蛋白质激酶调节
- 信号传导的分子机制.
背景情况:
- Raf-1蛋白激酶对于传输促进细胞生长的信号 (mitogenic信号) 是至关重要的.
- 激活Raf-1的确切机制尚不清楚.
- 了解Raf-1调节是解读细胞生长控制的关键.
研究的目的:
- 为了研究Raf-1无活化的机制.
- 为了确定参与调节Raf-1活动的因素.
- 探索酸酶在Raf-1调节中的作用.
主要方法:
- 纯化的人类Raf-1被用氨酸-氨酸和氨酸酸酶治疗.
- 在酸酶治疗后评估了Raf-1的酶活性.
- 来自转化细胞的等离子膜充满了瓜诺辛三酸盐 (GTP).
- 研究了14-3-3泽塔蛋白和热冲击蛋白90对Raf-1无活化的作用.
主要成果:
- 用氨酸-氨酸或氨酸酸酶的治疗使净化Raf-1无活化.
- 通过14-3-3泽塔蛋白和热冲击蛋白90,防止净化Raf-1的无活化.
- 用GTP加载血导致内源和外源Raf-1的失活.
- 蛋白酸酶抑制剂阻断了GTP诱导的Raf-1失活.
结论:
- 由GTP调节的细胞膜相关蛋白酸酶负责Raf-1的不活化.
- 这些发现揭示了Raf-1激酶活性的新型调节途径.
- 这一发现对理解米托基因信号传导和细胞增殖控制有重要意义.