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两个开放的复合体和Mg2+的要求打开了lambda PR转录的起始点
1Department of Chemistry, University of Wisconsin, Madison 53706.
概括
离子 (Mg2+) 改变了埃舍里希亚大肠杆菌RNA聚合酶在lambda PR促进体的开放复合物的结构. 这种结构变化对于形成具有转录能力的开放复合物RPo2.2至关重要.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 大肠杆菌RNA聚合酶 (Eσ70) 在促进体部位形成不同的开放复合体.
- 已知离子 (Mg2+) 能够影响转录启动.
- 之前的动力学研究表明,Mg2+的吸收是RPo2形成所必需的.
研究的目的:
- 研究RNA聚合酶与Mg2+形成的开放复合体之间的结构差异.
- 阐明Mg2+在RPo1到RPo2的转换中的作用.
主要方法:
- 使用的是甲 (KMnO4) 足迹.
- 实验是在Mg2+的缺席和存在下进行的.
- 分析的重点是兰巴PR促进体和Eσ70RNA聚合酶.
主要成果:
- 确定了两个不同的开放复合体,即RPo1 (没有Mg2+) 和RPo2 (有Mg2+).
- RP01 呈现出最多 12 个基的单链区域.
- RP02显示了一个更大的单链区域,至少跨越14个基,并延伸到转录开始地点 (+1, +2).
结论:
- 存在Mg2+会诱导RNA聚合酶开放复合物的显著结构变化.
- 这些结构变化,特别是RPo2中扩展的单链区域,为Mg2+吸收在形成转录活性RPo2复合物的必要性提供了结构基础.