超级卷曲的局部域在体内激活一个真核生物促进体

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 基因表达 基因表达
• 在DNA拓学上.

背景情况:

• 越来越多地认识到DNA拓学在调节真核生物基因表达中的作用.
• 之前的研究表明,在各种细胞环境中,线性DNA模板的转录水平与圆形模板相比显著较低.
• 众所周知,Xenopus卵细胞中的核糖体RNA (rRNA) 的转录取决于圆形DNA模板.

研究的目的:

• 调查菌体T7RNA聚合酶能否克服Xenopus卵细胞转录的拓要求.
• 确定局部超级卷是否可以替代循环DNA模板来支持rRNA转录.

主要方法:

• 利用Xenopus卵细胞作为体内系统进行转录研究.
• 使用菌体T7RNA聚合酶和转录试验的分离促进体.
• 从线性化与潜在的超绕DNA片段的转录活动进行比较.

主要成果:

• 体T7RNA聚合酶转录部分取代了Xenopus卵细胞中循环DNA模板的需要.
• 有证据表明,局部的,短暂的超卷域可以在短的DNA片段上形成.
• 这些短暂的超卷域似乎足以满足XenopusrRNA转录的拓需求.

结论:

• 局部超卷域的形成,而不是模板的整体圆性,可能对转录至关重要.
• 菌体T7RNA聚合酶显示出在循环性缺失的条件下促进转录的能力.
• 这一发现为体内基因表达的最小拓要求提供了新的见解.