在RNA聚合酶活性中心中的催化残留物映射
E Zaychikov1, E Martin, L Denissova
1Limnological Institute, Russian Academy of Sciences, Irkutsk, Russia.
Science (New York, N.Y.)
|July 5, 1996
概括
在大肠杆菌RNA聚合酶中用铁 (Fe2+) 代替 (Mg2+) 会产生基. 这些基因分裂了DNA和蛋白质,揭示了NADFDGD图案.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 大肠杆菌RNA聚合酶 (RNAP) 对于转录至关重要.
- RNAP的活性部位含有催化过程中必不可少的Mg2+离子.
- 了解RNAP的活性部位和金属离子协调是其功能的关键.
研究的目的:
- 调查活性位点Mg2+离子在RNAP功能中的作用.
- 为了确定RNAP内的金属结合部位.
- 阐明RNAP中激素诱导裂变的机制.
主要方法:
- 在RNAP中的NADFDGD基因的位点导向突变发生.
- 酶性测试用于评估DNA和蛋白质裂变.
- 突变RNAP活动和复合体形成的表征.
主要成果:
- 在RNAP中Fe2+替代Mg2+会产生基基.
- 这些基因在转录开始部位附近切割DNA,在NADFDGD基因上切割RNAPβ'亚单元.
- 在NADFDGD基因中将亚斯巴酸盐残留物转化为阿拉宁,导致一种催化不活的RNAP.
- 突变RNAP保留了促进体结合和开放复杂形成的能力.
- 突变RNAP未能支持Fe2+诱导的DNA或蛋白质裂变.
结论:
- 保存的NADFDGD动机对于化RNAP中的活性位点Mg2+离子至关重要.
- 这种动图对于催化活性和激素诱导的裂变都至关重要.
- 这些发现为RNAP中金属离子的结构和功能作用提供了洞察力.
