通过逆转录酶介导的逆转录素修复染色体断裂

科学领域:

• 遗传学 是一个遗传学.
• 分子生物学分子生物学
• 基因组学就是基因组学.

背景情况:

• 短和长间隔的核元素 (SINE和LINE) 和伪基因在真核基因组中非常丰富.
• 反转录酶 (RT) 介导的现象在基因组进化中发挥着重要作用.
• 驱动这些元素传播的机制及其与DNA修复的联系在很大程度上是未知的.

研究的目的:

• 调查RT介导事件是否参与双链断裂 (DSB) 的修复.
• 在Saccharomyces cerevisiae中建立一个选择系统,以研究DSB和RT活动之间的联系.
• 阐明补充DNA (cDNA) 在断裂部位插入的机制.

主要方法:

• 在酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 中开发一种选择系统.
• 在交配类型 (MAT) 位点使用HO内核酶诱导特定的DSB.
• 在存在功能性RT (来自人类L1,酵母Tyl或Crithidia CRE1) 和缺乏同源重组的情况下,对幸存细胞的分析.
• 插入连接的序列,以确定修复机制.

主要成果:

• 酵母中的DSB可以通过在破裂部位插入cDNA来修复.
• 在没有同源重组的情况下,标记的cDNA主要被插入HO内核酶诱导的DSB.
• 插入事件主要通过非同类重组发生,由结节序列表示.
• 来自各种来源的功能性RT促进了cDNA插入DSB.

结论:

• 内生逆元素可能在修复染色体断裂方面发挥作用.
• 通过RT介导的cDNA插入为遗传物质的传播提供了一种机制.
• 这项研究提供了实验证据,将反元素活动与DNA修复途径联系起来.