相关实验视频
通过核U5 snRNA转激活II组内拼接
M Hetzer1, G Wurzer, R J Schweyen
1Vienna Biocenter, Institute of Microbiology and Genetics, University of Vienna, Austria. hetzer@gem.univie.ac.at
Nature
|March 27, 1997
概括
第二组内子和结合体共享RNA结构,这对结合至关重要. 在II组内中的ID3结构,像spliceosomes中的U5 snRNA一样,在结合过程中定了5'外,这表明了进化链接.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 进化生物学 进化生物学
- RNA 生物化学 生物化学
背景情况:
- 第二组的内子和拼接酶体进行具有结构相似性的RNA拼接.
- 据推测,II组内基子的ID3子域是结合体U5 snRNA的进化前体.
- 这两种结构都与5'拼接部位识别和外子定有关.
研究的目的:
- 调查ID3子域在II组内拼接中的作用.
- 确定U5 snRNA是否可以功能地补充ID3的损失.
- 探索II组内子和结合体之间的进化关系.
主要方法:
- 位点定向的突变发生,以从bI1组II内突中去除ID3子域.
- 在体外拼接测试以评估5'拼接部位识别和外链结合.
- 使用ID3和U5snRNA的RNA片段进行补充试验.
主要成果:
- 即使没有ID3.3,也实现了准确高效的5'拼接部位识别.
- 在没有ID3的情况下,外因子定显著受损.
- 添加ID3或U5snRNA片段恢复了外因子定.
- U5 snRNA 在功能上补充了 ID3.3 的损失.
结论:
- ID3和U5 snRNA的主要功能是在拼接过程中定5'外子.
- 结构性RNA网络可以构成II组内子和结合酶体的催化核心.
- 这支持了第二组内子是结合体组件的进化前身的假设.