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通过聚合酶与非模板链寡核酸结合来测量促进体的识别
1Section of Biochemistry, Molecular and Cell Biology, Biotechnology Building, Cornell University, Ithaca, NY 14853, USA.
Science (New York, N.Y.)
|May 23, 1997
概括
特定的蛋白质-DNA相互作用在转录启动过程中稳定了DNA解. RNA聚合酶的西格玛因子70子单元与非模板DNA基接触,影响这种相互作用的突变改变了结合亲和力.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 转录启动需要DNA链分离以获得RNA聚合酶的访问.
- 蛋白质-DNA相互作用在解过程中稳定开放的促进体复合体.
- RNA聚合酶的西格玛因子70子单元对于大肠杆菌中促进体的识别至关重要.
研究的目的:
- 检测和量化RNA聚合酶和促进DNA之间的特定相互作用.
- 研究非模板DNA链基在促进体复合体稳定中的作用.
- 为了确定西格玛因子70的保存区域2对RNA聚合酶促进体结合亲和力的贡献.
主要方法:
- 在RNA聚合酶和非模板寡核酸序列之间的结合亲缘关系的量化.
- 在70西格玛因子的保存区域2的位点导向突变发生.
- 评估突变对促进子功能和结合亲和力的影响.
主要成果:
- 检测和量化了RNA聚合酶和非模板DNA之间的特定结合相互作用.
- 西格玛因子70的保存区域2直接接触非模板DNA链基.
- 保存区域2中的突变显著改变了酶与寡核酸的结合亲和力.
结论:
- 涉及非模板DNA基的特定蛋白质-DNA相互作用对于在转录启动过程中稳定促进体复合物至关重要.
- 西格玛因子70子单元在识别和通过其保存区域2与非模板DNA链结合方面发挥着直接作用.
- 影响这些相互作用的突变对促进体活性和酶-DNA结合有功能性影响.