通过转基因BAC救援对小鼠昼夜钟基因的功能鉴定
M P Antoch1, E J Song, A M Chang
1National Science Foundation Center for Biological Timing, Department of Neurobiology and Physiology, Northwestern University, Evanston, Illinois 60208, USA.
Cell
|May 16, 1997
概括
研究人员在小鼠中使用细菌人工染色体 (BAC) 转基因确定了昼夜钟基因. 这种通过救援方法的克隆方法证实了时钟.
科学领域:
- 遗传学 是一个遗传学.
- 时间生物学 时间生物学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 定位克隆是一种用于基因鉴定的常见方法.
- 了解昼夜节律的遗传基础对于生物和医学研究至关重要.
研究的目的:
- 为了确定负责小鼠昼夜节律调节的基因.
- 用细菌人工染色体 (BAC) 克隆来证明体内补充的有效性,用于基因发现.
主要方法:
- 在转基因小鼠中利用与细菌人工染色体 (BAC) 克隆的体内补充.
- 使用重叠的BAC转基因来划分基因的边界.
- 分析了钟表基因过度表达的功能影响.
主要成果:
- 一个140kb的BAC转基因成功地在钟表突变小鼠中拯救了表型,证实了它的作用.
- 确定了一个大型的转录单元 (约. 10万个基对) 作为时钟基因.
- 时钟基因编码了一个新的基本螺旋环螺旋PAS域蛋白.
- 时钟转基因的过度表达缩短了超过野生类型水平的昼夜周期.
结论:
- 确立了"救援克隆"作为一种有效和最终的小鼠基因识别方法.
- 证实了时钟基因在哺乳动物昼夜节律节拍系统中的重要作用.
- 描述了时钟基因及其蛋白质产物.


