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一种与拼接因子U2AF35相关的蛋白质,在前mRNA的拼接中与U2AF65和SR蛋白相互作用

H Tronchère¹, J Wang, X D Fu

¹Department and School of Medicine, University of California at San Diego, La Jolla 92093-0651, USA.

|July 24, 1997

概括

一种新发现的蛋白质,Urp,通过与U2AF65/U2AF35异构体相互作用,对前mRNA剪接至关重要. 与U2AF35不同的是,Urp通过桥接U2AF65和SR蛋白来促进结合酶组合.

科学领域:

分子生物学分子生物学
在RNA分离过程中.
基因规则基因规则

背景情况:

预mRNA拼接需要U2AF65/U2AF35异构体进行3'拼接部位识别.
通过其RS域,U2AF35与其他拼接因子的相互作用尚未完全理解.
通过U2AF35建立多个网络交互的机制尚不清楚.

研究的目的:

为了研究U2AF35相关蛋白 (Urp) 在mRNA前拼接中的功能.
阐明Urp在spliceosome组装中的作用及其与已知的拼接因子的相互作用.

主要方法:

从核提取物中消耗Urp以评估拼接缺陷.
使用重组Urp和U2AF35.35的补充试验.
共同免疫衰竭以确定Urp与U2AF65/U2AF35异构体的关联.
有约束力的研究将Urp与U2AF65和SR蛋白的相互作用映射出来.

主要成果:

缺乏Urp的核提取物表现出有缺陷的拼接活动.
重组Urp恢复了拼接,但U2AF35不能,表明不同的功能.
发现Urp与U2AF65/U2AF35异构体有关.
Urp通过U2AF35同源区域与U2AF65相互作用,并通过其RS域与SR蛋白相互作用.

结论:

Urp对于mRNA前拼接至关重要,并且独立于U2AF35.35的功能.
Urp充当桥梁,将U2AF65/U2AF35异构体与SR蛋白连接起来.
Urp和U2AF35可以协同将RS-域蛋白放置在拼接体内,确保准确的拼接复合体形成.

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