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用G1 Cdk对Sic1p进行酸化,这是其降解和进入S相所需的
R Verma1, R S Annan, M J Huddleston
1Division of Biology, Box 156-29, California Institute of Technology, Pasadena, CA 91125, USA.
Science (New York, N.Y.)
|October 23, 1997
概括
发芽的酵母细胞周期进展依赖于G1环林依赖激酶 (Cdk) 触发Sic1p降解. 通过G1 Cdk对Sic1p的酸化使其成为无处不在和破坏的目标,从而使G1/S相过渡成为可能.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 在发芽的酵母中,从G1到S阶段的过渡对于细胞循环的进展至关重要.
- S相环林依赖激酶 (Cdk) 抑制剂Sic1p的降解是一个由G1Cdks调节的关键事件.
研究的目的:
- 为了研究G1 Cdk酸化位在Sic1p中的作用.
- 阐明Sic1p是降解目标的机制.
- 了解酸化和蛋白解对G1/S过渡的贡献.
主要方法:
- 采用多维电子喷雾质谱法,在体外和体内绘制Sic1p上的G1 Cdk酸化位.
- 分析了一种缺乏关键酸化位点的Sic1p突变.
- 使用纯化Sic1p和循环素贫的G1提取物进行了乌比基化试验.
主要成果:
- 一个缺少三个Cdk酸化位点的Sic1p突变体在体外对Cdc34p依赖的无化具有抗性.
- 这种突变蛋白在体内是稳定的,并阻止了DNA复制.
- 纯化Sic1p在循环素贫乏的G1提取物中被普遍化,突出了G1循环素的作用.
结论:
- G1 Cdk对Sic1p的酸化对于其无处不在和随后的降解至关重要.
- G1环旋体在准Sic1p进行破坏方面发挥着至关重要的作用.
- 提出了一个分子模型,其中酸化和蛋白解合作调节发芽酵母中的G1/S相过渡.