由酶Cds1和Chk1强制执行的复制检查点

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 细胞循环规则 细胞循环规则
• 酵母遗传学 酵母遗传学

背景情况:

• 细胞分裂周期由检查点严格调节,确保在线粒分裂之前适当的DNA复制和修复.
• 对于启动线粒分裂至关重要的Cdc2激酶活性,由调节蛋白控制,包括Cdc25等酸酶和Wee1和Mik1.1等激酶.
• 如果DNA复制不完整或受损,DNA复制检查点可以防止进入线粒分裂,但其特定的作用因子尚未完全理解.

研究的目的:

• 为了确定DNA复制检查点的分子效应因子,该检查点在裂变酵母中被氧尿素 (HU) 激活.
• 阐明Cds1和Chk1激酶在强制执行复制检查点和调节细胞分裂中的作用.

主要方法:

• 用氧尿素 (HU) 对裂变酵母进行处理,以诱导复制应激.
• 对HU的反应中激酶活性 (Cds1) 和蛋白质水平 (Mik1) 的分析.
• 使用cds1和chk1删除突变的基因分析,以评估它们在HU诱导的细胞循环停止中的作用.

主要成果:

• 基尿素治疗刺激了蛋白质激酶Cds1.1.
• 对于HU诱导的Mik1水平的增加,Cds1活性是必需的,并且似乎酸化了Wee1激酶.
• 缺少Cds1和Chk1 (cds1 chk1细胞) 消除了HU诱导的细胞分裂停止,表明它们的联合功能.

结论:

• Cds1和Chk1协同行动,在裂变酵母中强制执行DNA复制检查点.
• 在复制应激下,Cds1通过影响抑制性激酶Wee1和Mik1.1来调节细胞分裂停止.
• 这些发现揭示了复制检查点路径的关键组成部分,将DNA复制状态与细胞周期进展联系起来.