相关实验视频
通过酸化来调节细胞死亡蛋白酶caspase-9的作用
M H Cardone1, N Roy, H R Stennicke
1Program on Apoptosis and Cell Death Research, The Burnham Institute, La Jolla, CA 92037, USA.
Science (New York, N.Y.)
|November 13, 1998
概括
蛋白质酸化直接调节caspases,关键的亡蛋白酶. 激酶阿克特在素-196上化前酶-9 (前酶-9),抑制其活性并影响亡.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 体酶是关键的细胞内蛋白酶,可以启动和执行亡.
- 激酶Akt和p21-Ras是已知的调节者,参与细胞信号通路.
研究的目的:
- 调查蛋白质酸化对酶活性的直接调节作用.
- 为了确定Akt和Ras信号是否影响caspase-9的处理和功能.
主要方法:
- 细胞表达活性Ras和Akt的细胞表达.
- 细胞质提取物的制备.
- 在实验室中使用重组酶-9.9进行酸化试验.
- 卡斯巴-9 (Ser196Ala) 的位点定向突变发生.
主要成果:
- 在细胞中,Akt和p21-Ras诱导了前酶-9的酸化.
- 在表达活性Ras或Akt的细胞中,细胞染色体c诱导的pro-caspase-9的处理受损.
- 阿克特在素-196上直接化复合酶-9,抑制其蛋白酶活性.
- 突变的pro-caspase-9 (Ser196Ala) 抵抗了Akt介导的抑制和酸化,导致了Akt耐药的亡.
结论:
- 酶活性可以通过蛋白质酸化直接调节.
- 卡斯巴-9的阿克特介导酸化代表了亡中一种新的调节机制.